caldo de soja tripticasa
5 ml tubos de ensayo, palitos de paletas de madera
estériles esterilizados y tapados
marcado Cera lápiz
tubo Gradilla
Toallas de papel
Bleach (solución al 10 por ciento)
Mechero Bunsen
Partidos
bucle de inoculación
agar tripticasa de soja
placas Petri
Incubadora
Frigorífico
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tubos de muestra de suelo Matemáticas 1 prueba se utilizan para diluir las muestras de suelo .
Dedique un tubo de ensayo estéril con corcho contendo 5 ml de caldo de soja tripticasa de nutrientes. Elegir un palito de paleta estéril.
2 Use un palito de paleta estéril para recoger del suelo.
Salir a la calle y recoger una pequeña muestra de suelo con la punta del palito de paleta , utilizando una técnica estéril , un método para asegurar que la muestra no está contaminada , y el usuario no está infectado.
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Destape el tubo de ensayo y añadir el suelo al caldo de nutrientes en el tubo de ensayo. Mezclar el suelo en el caldo con el palito de paleta . Cubra el tubo de ensayo con la tapa. Escribe la ubicación de la fecha y la recogida de la colección en el lado del tubo de ensayo usando la cera lápiz de marcar .
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Poner el tubo de ensayo en un bastidor de tubo de ensayo durante aproximadamente 30 minutos para permitir que el suelo se asiente a la parte inferior.
Inocular Petri Dish
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Desinfectar la superficie de trabajo por la limpieza con un 10 por ciento de la solución de blanqueador y toallas de papel .
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Apague la placa de Petri por lo que la tapa inferior que contiene el agar hacia arriba. Dibuja una T en la tapa inferior , con el larguero de la T separación del tercio superior de la tapa y el vástago de la T que divide los dos tercios inferiores a la mitad.
7 Use un mechero Bunsen a las llamas la inoculación de bucles .
Encienda y encender el quemador Bunsen . Llama el asa de siembra sobre la llama de un mechero Bunsen .
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Destape el tubo de ensayo y tocar el loop a la capa superior de líquido claro. Retirar el bucle y volver a cubrir el tubo de ensayo.
El Método T- racha
9 Haga una raya en zigzag sobre una mitad del plato.
Utilice el larguero de la T que dibujó en el reverso de la tapa inferior como punto de referencia . Toque el asa de inoculación en un lado del espacio encima del travesaño T y sacar la punta sobre la superficie del agar en una línea en zigzag , poniendo fin a la línea en el lado opuesto del espacio.
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Quite el asa de inoculación y cerrar la caja de Petri . Flamear el asa en el mechero Bunsen , y deje que se enfríe brevemente. Abra la caja de Petri y tocar el loop a un punto cerca del final de la línea ya dibujada por el bucle. Haz otra línea en zigzag en ángulos rectos a la primera línea , que cubre el primer espacio debajo de la T travesaño y a un lado del vástago .
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Retire el bucle y cerrar la placa de Petri . Flamear el asa de nuevo , abra la placa de Petri , y tocar el bucle ligeramente enfriado a la segunda línea cerca de su fin. Dibuje otra línea en zigzag en ángulos rectos a la segunda línea en el espacio abierto que queda en la placa de Petri .
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Cierre la placa de Petri después de retirar el bucle . Flamear el asa y déjela a un lado . Apague el quemador Bunsen .
Cultura Secondary
13 Seleccione una sola colonia para aislar aún más bacterias.
Coloque la placa de Petri en un incubador a 30 grados Celsius durante 48 horas . Sacarlo y examinar el agar para el crecimiento de colonias bacterianas . Elija una colonia que se ve uniforme y discreta en apariencia general , una indicación de que la colonia surgió de una sola bacteria. Círculo de la ubicación de la colonia en la parte posterior de la tapa inferior con el lápiz de marcado.
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Llama el asa de inoculación . Abra la caja de Petri y tocar el enfriado ligeramente bucle para el centro de la colonia.
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Repita los pasos para hacer una camiseta de rayas en una nueva placa de Petri con agar en la tapa inferior . Cuando se realiza la racha y la placa de Petri está cerrado , escribir la fecha y la muestra de suelo el inóculo fue tomada de en el lado inferior de la tapa inferior . Apague el quemador Bunsen .
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Incubar la placa de Petri a 30 grados Celsius durante 48 horas. Examine las colonias que han crecido en el agar , en busca de la uniformidad de color, forma y textura . Repetir el procedimiento de cultivo secundaria si hay colonias que se desvían marcadamente en el aspecto de los otros , lo que indica que una sola bacteria no fue aislado .
17 colonias de aspecto idéntico indican aislamiento bacteriano .
Refrigerar la placa de agar que contiene colonias de apariencia idéntica en él , con la uniformidad ser una buena indicación de que solamente una sola bacteria se ha aislado de la muestra de suelo .
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realizar otras pruebas para identificación de la bacteria aislada si se desea, por ejemplo, la tinción de Gram , examen microscópico y la cultura en diferentes tipos de agar.
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